1. Polnilni medij (faza polnilnega medija)
(1) Med polnjenjem medija opazujte, ali pride do kopičenja. Če opazite kopičenje, prenehajte s polnjenjem in nadaljujte naslednji dan po nadaljnjem opazovanju.
(2) Med polnjenjem medija je treba sprejeti občasno prezračevanje. Ponoči je mogoče vzdrževati neprekinjeno prezračevanje, vendar je treba stopnjo prezračevanja zmanjšati.
(3) Po 24 urah delovanja uvedite neprekinjen dotok za 2–3 ure, nato pa nadaljujte s prej omenjenim prezračevanjem. Po 48 urah delovanja opazujte nastanek biofilma na mediju. Povečajte stopnjo dotoka in podaljšajte trajanje dotoka, pri tem pa spremljajte raven raztopljenega kisika (DO) v posodi, ki bi morala biti idealno vzdrževana pri 1,5–2,0 mg/L. Po 72 urah delovanja sprožimo neprekinjen dotok in ga postopoma povečujemo do projektne ravni. Spremljajte (konvencionalne) indikatorje kakovosti dotočne in odpadne vode. Pričakuje se, da bodo projektne zahteve glede kakovosti vode izpolnjene v približno 7 dneh.
2. Faza gojenja biofilma
Gojenje biofilma se nanaša na postopek spodbujanja rasti in kopičenja mikroorganizmov v sistemu za obdelavo, da se doseže določena debelina biofilma na mediju. Glavne metode vključujejo statično gojenje in dinamično gojenje.
(1) Statično gojenje
Namen statične kultivacije je preprečiti, da bi novonastali mikroorganizmi odplaknili vodni tok, s čimer se poveča čas stika med mikroorganizmi in plastjo medija. Za pospešitev tvorbe biofilma se v začetni fazi enkrat dnevno dodajo hranila, kot so sečnina, diamonijev fosfat in 白糖 (sladkor) v razmerju C:N:P=100:5:1, da se prepreči pomanjkanje hranil v odpadni vodi.
Najprej se v biokemični rezervoar prečrpa inokulirano blato (10 % efektivne biokemične prostornine) in odpadna voda, čemur sledi začetek aeracijske kultivacije. Polnilni volumen medija v biokemični posodi mora predstavljati 35 %–40 % efektivne prostornine posode. Pustite sistem stati brez prezračevanja 4–5 ur, da olajšate pritrditev fiksiranih mikroorganizmov na medij. Nato zračite 1 uro, sledita še 2 uri stati in nato zračite 1 uro. Ponovite to operacijo. Po 4–5 dneh mora biti površina medija popolnoma prekrita z biofilmom. 6. dan začnite neprekinjeno nizko{17}}influentno uvajanje.
(2) Dinamično gojenje
Po 6 dneh zaprtega prezračevalnega gojenja se bo na površini medija oblikovala tanka plast rumenkasto-rjavega biofilma. Preklopite na neprekinjen dotok za dinamično pridelavo. Prilagodite hitrost dotoka in nadzorujte raven raztopljenega kisika (DO) med 2–4 mg/L (merjeno z merilnikom raztopljenega kisika). Po približno 15 dneh se bodo na gojiščih pojavile praživali, kot so amebe in Litonotus (opazovane pod biološkim mikroskopom). Medij bo na dotik lepljiv in spolzek. Po 20 dneh se bodo pojavili flagelati, vrtinci, paramecij in proste bakterije. Po nadaljnjih 20 dneh gojenja se bodo pojavili metazoji, kot so kolobarji in ogorčice, kar pomeni, da se je biofilm v celoti razvil. Nato se lahko začne neprekinjeno industrijsko delovanje.
3. Faza aklimatizacije biofilma
Namen aklimatizacije je izbrati mikroorganizme, prilagojene dejanskim razmeram kakovosti vode, in odstraniti ne-koristne mikroorganizme. Pri postopkih obdelave s funkcijami odstranjevanja dušika in fosforja aklimatizacija zagotavlja, da nitrifikacijske bakterije, denitrifikacijske bakterije in organizmi, ki kopičijo polifosfat- (PAO), postanejo prevladujoče mikrobne skupnosti.
Poseben pristop je vzdrževanje normalnega delovanja procesa ob strogem nadzoru procesnih parametrov. Povprečni raztopljeni kisik (DO) je treba vzdrževati med 2–3 mg/L, čas prezračevanja v aerobni posodi pa ne sme biti krajši od 5 ur. Med tem postopkom je treba dnevno izvajati meritve različnih indikatorjev kakovosti vode in kontrolnih parametrov. Ko povprečna debelina biofilma doseže približno 0,2–0,5 mm, velja, da je gojenje biofilma uspešno. Postopek se nadaljuje, dokler indikatorji iztoka, kot so BPK₅, SS in COD₆ᵣ, ne izpolnjujejo projektnih zahtev.